← Назад
Б. Среды для морских и солоноватоводных цианобактерий
ASN-IIIASN-III
Искусственная морская среда для цианобактерий
- Применение
- Морские Synechococcus, Oscillatoria, Phormidium, Lyngbya, Microcoleus морского и лиманного происхождения
- pH
- 7,5–8,0
- Источник
- Rippka et al., 1979
Состав
| Компонент | Количество на 1 л |
|---|---|
| NaCl | 25,0 г |
| MgCl₂·6H₂O | 2,0 г |
| MgSO₄·7H₂O | 3,5 г |
| KCl | 0,5 г |
| NaNO₃ | 0,75 г |
| K₂HPO₄·3H₂O | 0,02 г |
| CaCl₂·2H₂O | 0,5 г |
| Лимонная кислота | 3 мг |
| Цитрат железа-аммония | 3 мг |
| Na₂ЭДТА | 0,5 мг |
| Na₂CO₃ | 0,02 г |
| Раствор микроэлементов A5 + Co | 1,0 мл |
| Дистиллированная вода | до 1000 мл |
Раствор микроэлементов A5 + Co
на 100 мл раствора · расход 1 мл на 1 л среды (хватает на 100 л) · хранение 4 °C в тёмном стекле, 12 мес.
| Компонент | Навеска / объём |
|---|---|
| H₃BO₃ | 286 мг |
| MnCl₂·4H₂O | 181 мг |
| ZnSO₄·7H₂O | 22,2 мг |
| Na₂MoO₄·2H₂O | 39,0 мг |
| CuSO₄·5H₂O | 7,9 мг |
| Co(NO₃)₂·6H₂O | 4,94 мг (или 1 мл первичного р-ра 4,94 г/л) |
| Дистиллированная вода | до 100 мл |
Приготовление
Растворить NaCl → MgCl₂·6H₂O → MgSO₄·7H₂O → KCl → NaNO₃ → K₂HPO₄ → лимонную кислоту → цитрат железа-аммония → Na₂ЭДТА → Na₂CO₃ → 1 мл A5 + Co → последним CaCl₂·2H₂O при перемешивании → до 1000 мл → pH 7,5–8,0.
Примечания
- Безазотный вариант ASN-III₀: исключить NaNO₃ и заменить цитрат железа-аммония на цитрат железа.
- Для галотолерантных штаммов NaCl варьируют от 10 до 40 г/л, пропорционально изменяя MgCl₂·6H₂O и MgSO₄·7H₂O, чтобы сохранить ионные соотношения морской воды.
- Соотношение Mg:Ca в ASN-III существенно выше, чем в пресноводных средах — при адаптации пресноводного штамма к ASN-III снижают концентрацию всех солей вдвое (½ ASN-III) и повышают постепенно.
- Соли растворяют по одной, в указанном порядке; H₃BO₃ растворяется медленно — допускается подогрев до 40 °C. Кобальт вносят из первичного раствора: навеску 4,94 мг взвесить на обычных весах невозможно. Первичный раствор Co: 494 мг Co(NO₃)₂·6H₂O в 100 мл воды, взять 1 мл. Без кобальта раствор называется просто «A5». Появление осадка или помутнения — признак негодности.