← Артқа
Д. Теңіз суы негізіндегі орталар
PROVASOLI-ESProvasoli ES (байытылған теңіз суы)
Талапшыл теңіз микробалдырларына арналған орта
- Қолданылуы
- Теңіздік талшықтылар, гаптофитті, қызыл және қоңыр микробалдырлар, макрофиттердің зооспоралары
- pH
- 7,8–8,2
- Дереккөз
- Provasoli, 1968
Құрамы
| Компонент | 1 л-ге мөлшері |
|---|---|
| Теңіз суы | 980 мл |
| ES аналық ерітіндісі | 20 мл |
ES аналық ерітіндісі (Провазоли бойынша)
1 л-ге · 1 л ортаға 20 мл шығыны · сақтау 4 °C қараңғы шыныда, 6 ай
| Компонент | Өлшенді / көлемі |
|---|---|
| NaNO₃ | 3,5 г |
| Na₂-глицерофосфат | 0,5 г |
| Трис (Tris) | 0,5 г |
| P II металдар ерітіндісі | 25 мл |
| Fe-ЭДТА ерітіндісі (1:1) | 2,5 мл |
| Тиамин ерітіндісі (1 г/л) | 0,5 мл |
| Биотин ерітіндісі (10 мг/л) | 0,5 мл |
| B₁₂ ерітіндісі (10 мг/л) | 1,0 мл |
| Дистилденген су | 1000 мл-ге дейін |
P II металдар ерітіндісі (Провазоли бойынша) — жұмыс ерітіндісі
100 мл-ге · 1 л ES аналық ерітіндісіне 25 мл шығыны · сақтау 4 °C, 12 ай
| Компонент | Өлшенді / көлемі |
|---|---|
| H₃BO₃ | 114 мг |
| Na₂ЭДТА | 100 мг |
| MnSO₄·4H₂O | 16,4 мг |
| FeCl₃ бастапқы ерітіндісі | 1 мл |
| ZnSO₄ бастапқы ерітіндісі | 1 мл |
| CoSO₄ бастапқы ерітіндісі | 1 мл |
| Дистилденген су | 100 мл-ге дейін |
P II үшін бастапқы ерітінділер (бөлек дайындалады)
әрқайсысы 100 мл-ге · әрқайсысынан 1 мл-ден алынады · сақтау 4 °C, 12 ай
| Компонент | Өлшенді / көлемі |
|---|---|
| FeCl₃·6H₂O | 100 мл-ге 0,490 г |
| ZnSO₄·7H₂O | 100 мл-ге 0,220 г |
| CoSO₄·7H₂O | 100 мл-ге 0,048 г |
Provasoli ES үшін Fe-ЭДТА (1:1) ерітіндісі
100 мл-ге · 1 л ES аналық ерітіндісіне 2,5 мл шығыны · сақтау 4 °C, 6 ай
| Компонент | Өлшенді / көлемі |
|---|---|
| Fe(NH₄)₂(SO₄)₂·6H₂O (Мор тұзы) | 70,2 мг |
| Na₂ЭДТА | 60,0 мг |
| Дистилденген су | 100 мл-ге дейін |
Дайындау
Теңіз суын сүзіп, бөлек зарарсыздандыру керек. ES аналық ерітіндісі сүзу арқылы зарарсыздандырылады (оның құрамында витаминдер бар). Суыған теңіз суына асептикалық жолмен 20 мл аналық ерітінді енгізіледі.
Ескертулер
- Na₂-глицерофосфат — баяу босап шығатын органикалық фосфор көзі. Ол автоклавтау кезінде кальций фосфаттарының тұнбасын іс жүзінде бермейді, бұл — ортаның теңіз дақылдары үшін басты артықшылығы.
- ES/2 және ES/4 нұсқалары (литрге 10 және 5 мл аналық ерітінді) бай ортаны нашар көтеретін олиготрофты түрлер үшін қолданылады.
- Аналық ерітінді құрамындағы Tris концентрат теңіз суына енгізілгеннен кейін pH-ты тұрақтандырады.
- Шығыны көп болғандықтан (20 мл/л) литрге дайындалады: бір литр 50 л ортаға жетеді. Құрамында витаминдер бар, сондықтан автоклавтауға БОЛМАЙДЫ — 0,22 мкм арқылы сүзу арқылы зарарсыздандырылады. Витаминдер ерітінділері: 100 мл-ге тиамин 100 мг, 100 мл-ге биотин 1 мг, 100 мл-ге B₁₂ 1 мг; аналық ерітіндідегі қорытынды концентрациялар — 0,5 мг/л тиамин, 5 мкг/л биотин, 10 мкг/л B₁₂.
- Na₂ЭДТА бірінші болып ерітіледі, темір тұздары — соңғы болып.
- FeCl₃ ерітіндісі 1 тамшы конц. HCl-мен қышқылданады, әйтпесе темір сақтау кезінің өзінде гидролизденеді.
- Екі тұз бірге ерітіліп, комплекс түзілгенше 30 мин араластырылады — тұнбасыз тұрақты сары түс пайда болады. Fe:ЭДТА мольдік қатынасы 1:1-ге тең (әрқайсысы 1,79 ммоль/л).