← Артқа
Д. Теңіз суы негізіндегі орталар
WALNEУолн ортасы (Walne / Conway)
Аквадақылға арналған өндірістік орта
- Қолданылуы
- Моллюскалар мен асшаяндарға арналған жемдік микробалдырларды жаппай өсіру: Isochrysis, Chaetoceros, Skeletonema, Tetraselmis
- pH
- 8,0
- Дереккөз
- Walne, 1970; Conway medium
Құрамы
| Компонент | 1 л-ге мөлшері |
|---|---|
| Теңіз суы | 1000 мл |
| Уолнның негізгі қоректік ерітіндісі | 1,0 мл |
| Na₂SiO₃·9H₂O ерітіндісі (100 мл-ге 4 г) | 2,0 мл (тек диатомды микробалдырлар үшін) |
| Уолн витаминдер ерітіндісі | 0,1 мл |
Уолнның негізгі қоректік ерітіндісі
1 л-ге · 1 л ортаға 1 мл шығыны · сақтау 4 °C қараңғы шыныда, 6 ай
| Компонент | Өлшенді / көлемі |
|---|---|
| NaNO₃ | 100 г |
| Na₂ЭДТА | 45 г |
| H₃BO₃ | 33,6 г |
| NaH₂PO₄·2H₂O | 20 г |
| FeCl₃·6H₂O | 1,3 г |
| MnCl₂·4H₂O | 0,36 г |
| Уолн сирек металдар ерітіндісі | 1 мл |
| Дистилденген су | 1000 мл-ге дейін |
Уолн сирек металдар ерітіндісі
100 мл-ге · 1 л негізгі қоректік ерітіндіге 1 мл шығыны · сақтау 4 °C, 12 ай
| Компонент | Өлшенді / көлемі |
|---|---|
| ZnCl₂ | 2,1 г |
| CuSO₄·5H₂O | 2,0 г |
| CoCl₂·6H₂O | 2,0 г |
| (NH₄)₆Mo₇O₂₄·4H₂O | 0,9 г |
| Дистилденген су | 100 мл-ге дейін |
Уолн витаминдер ерітіндісі
100 мл-ге · 1 л ортаға 0,1 мл шығыны · сақтау −20 °C, 6 ай
| Компонент | Өлшенді / көлемі |
|---|---|
| Тиамин·HCl (B₁) | 200 мг |
| Цианокобаламин (B₁₂) | 10 мг |
| Дистилденген су | 100 мл-ге дейін |
Дайындау
Теңіз суын сүзіп, зарарсыздандыру керек. Суыған суға негізгі қоректік ерітіндіден 1 мл, диатомды микробалдырлармен жұмыс істегенде — силикат ерітіндісінен 2 мл, содан кейін витаминдер ерітіндісінен 0,1 мл енгізіледі (стерильді түрде, суығаннан кейін).
Ескертулер
- Негізгі ерітінді азотты, фосфорды, темірді және микроэлементтердің бір бөлігін бір құтыда біріктіреді — бұл ортаның өндірістік жағдайдағы басты практикалық артықшылығы.
- Сирек металдар ерітіндісі мен витаминдер ерітіндісі негізгі ерітіндіден бөлек дайындалып, бөлек сақталады.
- Аквадақылда орта жиі тазартылмаған, бірақ сүзілген әрі УК-мен өңделген теңіз суында автоклавтаусыз дайындалады — бұл ретте негізгі ерітіндінің дозасы 2 мл/л-ге дейін арттырылады.
- Өндірістік ерітінді: аквадақылда орта тоннамен дайындалатындықтан, литрге есептеп жасалады. Зертхана үшін барлық өлшендіні он есе азайтып әрі сирек металдар ерітіндісінен 0,1 мл алып, 100 мл дайындауға болады. Су 40–50 °C-қа дейін жылытылып, 1–2 мл конц. HCl-мен қышқылданады, әйтпесе ЭДТА мен бор қышқылы толық ерімейді. Сақтау кезінде лайлану немесе қоңыр Fe(OH)₃ тұнбасының пайда болуы — жарамсыздық белгісі.
- Ерітінді ортаға тікелей емес, Уолнның негізгі қоректік ерітіндісінің құрамына кіреді. Сақтау кезінде лайланады; мөлдірлету үшін 2–3 тамшы конц. HCl қосылады.
- Уолнның классикалық рецептурасында биотин жоқ. Ерітінді тек суыған ортаға және тек стерильді сүзу арқылы енгізіледі.