← Артқа
Е. Галофильді және мамандандырылған дақылдарға арналған орталар
JOHNSONDunaliella үшін Джонсон ортасы (Johnson)
Гипергалинді орта
- Қолданылуы
- Dunaliella salina, D. bardawil, D. viridis — β-каротин мен глицерин жинақтау
- pH
- 7,5 (каротиногенез үшін 7,0–7,5)
- Дереккөз
- Johnson et al., 1968; Borowitzka & Borowitzka, 1988
Құрамы
| Компонент | 1 л-ге мөлшері |
|---|---|
| NaCl | 87,7 г (1,5 М); диапазоны 29–234 г (0,5–4 М) |
| MgCl₂·6H₂O | 1,5 г |
| MgSO₄·7H₂O | 0,5 г |
| KCl | 0,2 г |
| CaCl₂·2H₂O | 0,2 г |
| KNO₃ | 1,0 г (немесе NaNO₃ 0,84 г) |
| NaHCO₃ | 0,043 г |
| KH₂PO₄ | 0,035 г |
| FeCl₃·6H₂O | 1,45 мг |
| Na₂ЭДТА | 189 мг |
| Джонсон микроэлементтер ерітіндісі | 1,0 мл |
| Дистилденген су | 1000 мл-ге дейін |
Джонсон ортасына арналған микроэлементтер ерітіндісі
100 мл-ге · 1 л ортаға 1 мл шығыны · сақтау 4 °C, 6 ай
| Компонент | Өлшенді / көлемі |
|---|---|
| H₃BO₃ | 61,0 мг |
| MnCl₂·4H₂O | 41,0 мг |
| ZnCl₂ бастапқы ерітіндісі | 1 мл |
| CuCl₂ бастапқы ерітіндісі | 1 мл |
| Молибдаттың бастапқы ерітіндісі | 1 мл |
| CoCl₂ бастапқы ерітіндісі | 1 мл |
| Дистилденген су | 100 мл-ге дейін |
Джонсон ортасы үшін бастапқы ерітінділер (бөлек дайындалады)
әрқайсысы 100 мл-ге · әрқайсысынан 1 мл-ден алынады · сақтау 4 °C, 6 ай
| Компонент | Өлшенді / көлемі |
|---|---|
| ZnCl₂ | 100 мл-ге 0,410 г |
| CuCl₂·2H₂O | 100 мл-ге 0,410 г |
| (NH₄)₆Mo₇O₂₄·4H₂O | 100 мл-ге 0,380 г |
| CoCl₂·6H₂O | 100 мл-ге 0,150 г |
Дайындау
NaCl-ді 700 мл суда еріту → MgCl₂·6H₂O → MgSO₄·7H₂O → KCl → KNO₃ → KH₂PO₄ → FeCl₃ + Na₂ЭДТА комплексін бөлек дайындап, енгізу → микроэлементтер ерітіндісінен 1 мл → CaCl₂·2H₂O → ең соңында NaHCO₃ → 1000 мл-ге дейін жеткізу → pH 7,5 → сүзу арқылы зарарсыздандыру.
Ескертулер
- Тұздылығы жоғары болғандықтан орта СҮЗУ АРҚЫЛЫ зарарсыздандырылады: автоклавтау CaSO₄ мен Mg(OH)₂-нің тұнбаға түсуін, сондай-ақ pH-тың күрт ығысуын тудырады.
- Dunaliella жасуша қабырғасынан айырылған. Ортаны дистилденген сумен сұйылтқанда жасушалар лезде лизиске ұшырайды — барлық манипуляциялар (шаю, санау үшін сұйылту, қайта егу) изоосмостық ерітінділермен жүргізіледі.
- Каротиногенезді индукциялау: NaCl-ді 3–4 М-ға дейін арттыру, азотты 5–10 есе төмендету және жарықтандыруды 300–500 мкмоль фотондар·м⁻²·с⁻¹-ке дейін көтеру. Бұл ретте дақылдың түсі жасылдан қызғылт-сарыға ауысады.
- Мұнда Na₂ЭДТА-ның темірге қатынасы әдеттен тыс үлкен (189 мг-ға қарсы 1,45 мг FeCl₃·6H₂O): хелаттаушының артық мөлшері жоғары иондық күште улы болатын ауыр металдарды да байланыстырады.
- Түпнұсқа рецептурада ерітінді он есе сұйығырақ және орта литріне 10 мл-ден енгізіледі. Мұнда ол жинақ үшін ортақ 1 мл/л шығынына келтірілген — ортадағы микроэлементтердің қорытынды концентрациялары түпнұсқадағымен бірдей.
- Төрт ерітінді жеке құтыларда сақталады. ZnCl₂ гигроскопиялық — өлшенді тез алынады, банка бірден жабылады.