← Артқа
Г. Тұщы су жасыл микробалдырларына арналған орталар
BBMBBM — Bold's Basal Medium (Болдтың негізгі ортасы)
Жасыл микробалдырларға арналған әмбебап орта
- Қолданылуы
- Chlorella, Scenedesmus (Desmodesmus), Chlorococcum, Ankistrodesmus, Bracteacoccus, топырақтың жасыл микробалдырлары
- pH
- 6,6–6,8
- Дереккөз
- Bischoff & Bold, 1963; UTEX Medium BBM
Құрамы
| Компонент | 1 л-ге мөлшері |
|---|---|
| NaNO₃ | 0,25 г |
| CaCl₂·2H₂O | 0,025 г |
| MgSO₄·7H₂O | 0,075 г |
| K₂HPO₄ | 0,075 г |
| KH₂PO₄ | 0,175 г |
| NaCl | 0,025 г |
| ЭДТА-KOH ерітіндісі | 1,0 мл |
| Темір ерітіндісі (FeSO₄-H₂SO₄) | 1,0 мл |
| Бор қышқылының ерітіндісі | 1,0 мл |
| BBM микроэлементтер ерітіндісі | 1,0 мл |
| Дистилденген су | 1000 мл-ге дейін |
BBM үшін ЭДТА-KOH ерітіндісі
100 мл-ге · 1 л ортаға 1 мл шығыны · сақтау 4 °C, 6 ай
| Компонент | Өлшенді / көлемі |
|---|---|
| Na₂ЭДТА | 5,0 г |
| KOH | 3,1 г |
| Дистилденген су | 100 мл-ге дейін |
BBM үшін темір ерітіндісі (FeSO₄-H₂SO₄)
100 мл-ге · 1 л ортаға 1 мл шығыны · сақтау 4 °C қараңғы шыныда, 2–3 ай
| Компонент | Өлшенді / көлемі |
|---|---|
| FeSO₄·7H₂O | 498 мг |
| H₂SO₄ (конц.) | 0,1 мл (2 тамшы) |
| Дистилденген су | 100 мл-ге дейін |
BBM үшін бор қышқылының ерітіндісі
100 мл-ге · 1 л ортаға 1 мл шығыны · сақтау 4 °C, 12 ай
| Компонент | Өлшенді / көлемі |
|---|---|
| H₃BO₃ | 1,142 г |
| Дистилденген су | 100 мл-ге дейін |
BBM микроэлементтер ерітіндісі (Болд бойынша)
100 мл ерітіндіге · 1 л ортаға 1 мл шығыны · сақтау 4 °C, 6 ай
| Компонент | Өлшенді / көлемі |
|---|---|
| ZnSO₄·7H₂O | 882 мг |
| CuSO₄·5H₂O | 157 мг |
| MnCl₂·4H₂O | 144 мг |
| MoO₃ | 71 мг (немесе Na₂MoO₄·2H₂O 119 мг) |
| Co(NO₃)₂·6H₂O | 49 мг |
| Дистилденген су | 100 мл-ге дейін |
Дайындау
900 мл суда NaNO₃ еріту → MgSO₄·7H₂O → NaCl → K₂HPO₄ → KH₂PO₄ → ЭДТА-KOH ерітіндісінен, темір ерітіндісінен, бор қышқылы ерітіндісінен және микроэлементтер ерітіндісінен 1 мл-ден енгізу → ең соңында қарқынды араластыра отырып CaCl₂·2H₂O қосу → 1000 мл-ге дейін жеткізу → pH 6,6–6,8.
Ескертулер
- Төрт көмекші ерітінді БӨЛЕК-БӨЛЕК дайындалып, сақталады — бұл Болд рецептурасының принципті талабы: ЭДТА-KOH пен FeSO₄-H₂SO₄ концентраттарын араластырғанда бірден тұнба түзіледі.
- Фосфаттар мен CaCl₂ әртүрлі аналық ерітінділерден және міндетті түрде сұйылтылған ерітіндіге енгізіледі, әйтпесе Ca₃(PO₄)₂ тұнбаға түседі — тән ақ лай пайда болады.
- K₂HPO₄ + KH₂PO₄ жұбы әлсіз қышқыл pH-ты ұстап тұратын фосфаттық буфер түзеді; қосымша буфер қажет емес.
- Азоттың молярлық эквиваленті: NaNO₃ — 2,94 мМ, бұл BG-11-дегіден алты есе төмен; жинақтаушы дақылдар үшін 3N-BBM қолданылады.
- Сілті бірінші болып енгізіледі: бейтарап суда ЭДТА өте баяу ериді. Ерітінді темір ерітіндісінен бөлек сақталады — концентраттарды араластырғанда тұнба түзіледі.
- Күкірт қышқылы консервант рөлін атқарады: онсыз Fe²⁺ тез арада Fe³⁺-ке дейін тотығып, гидроксид түрінде тұнбаға түседі. Тат түсті лайдың пайда болуы — жарамсыздық белгісі, ерітінді әр 2–3 ай сайын жаңартылады.
- Болд рецептурасында бор жоғары концентрациясына байланысты жалпы микроэлементтер ерітіндісінен бөлек ерітіндіге шығарылған. Баяу ериді — 40 °C-қа дейін жылыту керек.
- Молибден триоксиді MoO₃ суда іс жүзінде ерімейді — оны алдын ала 0,1 мл 1 М NaOH-та ерітеді. Na₂MoO₄·2H₂O-ға эквимолярлы ауыстырғанда бұл қадам қажет емес.